主要的靶向药物结合物，如抗体-药物结合物（ADCs）代表了肿瘤学中的变革性治疗模式。尽管其临床成功是无可否认的——市场预计将达到260亿美元——但该领域仍受到一个根本性限制的制约：对有效的受体介导内吞和溶酶体运输以实现药物释放的强依赖。这种内吞前提创造了一个双重瓶颈。首先，它将可药物靶点的范围限制在小部分人类膜蛋白组（超过2000种蛋白质中约180种）内，这些蛋白质经历有效的内化，导致开发竞争集中在少数抗原（如HER2和TROP2）上。其次，它使药物递送受到多步溶酶体运输途径的累积低效影响，只导致一小部分内化的结合物成功释放其负载。尽管最新证据表明，细胞外负载释放在某些情况下也可能有助于ADC的疗效，但该领域的主流模式和优化工作仍然集中在内吞作用。因此，大多数具有较低内化效率的肿瘤特异性细胞表面抗原仍然是一个未开发的“蓝海”，代表着扩展药物结合物治疗范围的重大机遇。图1：PhoPEx化学使得靶向药物释放的BTR策略成为可能。图a，BTR与ITR策略相比的示意图。图b，结合-连接策略与BTR策略的比较。图c，PhoPEx反应的逐步发展。图d，FAPI与FAP蛋白（PDB: 1z68）的分子对接，指示PhoPEx反应的潜在残基。图e，FAPI-PhoPEx-香豆素与纯化的FAP蛋白共同孵育的荧光强度测定（n = 5个独立样本）。图f，体外添加FAP蛋白时荧光分子释放的代表性照片。FAPI-PhoPEx-MeRho（500 nM）与纯化的FAP（2 μM）在37°C的PBS（pH 7.4）中孵育，而对照组仅包含500 nM FAPI-PhoPEx-MeRho而不含FAP蛋白。图g，FAP介导释放的共聚焦荧光显微镜成像。HT1080-FAP细胞与HT1080对照细胞共同孵育FAPI-PhoPEx-MeRho 24小时。比例尺，50μm。图h，对HT1080-FAP细胞进行的细胞活力测定，这些细胞使用的结合物（50 nM）包含PhoPEx连接子或经典的Val-Cit-连接子。对每种连接子与MMAE或MMAF的结合物处理后的细胞活力进行了评估（n = 6生物重复）。图i，治疗剂量方案示意图（化合物1）。图j，携带HT1080-FAP或HT1080肿瘤的小鼠模型的肿瘤生长曲线（n = 每组4只小鼠）。图k，单个肿瘤生长曲线。数据以均值±标准差(e, h)和均值+标准差(j)的形式显示。使用双尾未配对Student's t检验（e），单因素方差分析后接Tukey事后检验（h）和双因素方差分析后接Tukey事后检验（j）进行统计分析。数据代表两（f, g）独立实验。图b中的插图由BioRender创建。刘, Z. https://BioRender.com/mvilhoy (2026). 来源数据FAP的例子展示了这一未开发的潜力。作为一种在肿瘤相关成纤维细胞中高表达且在正常组织中表达极少的全癌抗原，其卓越的靶向潜力在超过28种癌症类型中得到了FAPI基础的放射药物的诊断成功验证。然而，FAP靶向药物结合物（如临床候选药物OMTX705）的开发受到了FAP的低内化效率的阻碍，最佳反应仅在26%的患者中实现疾病稳定。这一僵局突显了对绕过内吞机制的药物释放模式的未满足需求。受配体导向化学原理的启发，我们开发了一种结合-释放（BTR）策略，用于独立于内吞的药物递送。我们的核心设计涉及工程一个在循环中保持稳定的新结合物连接子。然而，在配体-受体结合时，当连接子接近靶标的结合口袋中的亲核残基时，可以释放负载。这一邻近诱导反应触发在肿瘤部位直接有效、独立于内吞的释放膜可渗透的细胞毒性负载，从而绕过内吞瓶颈。